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紫外可見分光光度計原理及應(yīng)用

更新時間:2013-11-22 點擊量:1135

1.原理
  物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量, 相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其 *的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測 定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
  紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比
  2 應(yīng)用
  2.1 檢定物質(zhì)
  根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
  2.2 與標準物及標準圖譜對照
  將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)*一致。如果沒有標樣,也可以和現(xiàn)成的標 準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
  2.3 比較zui大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
  2.4 純度檢驗
  2.5 推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
  2.6 氫鍵強度的測定
  實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑 。
  2.7 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
  2.8 反應(yīng)動力學研究
  2.9 在有機分析中的應(yīng)用
  有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學,它是在有機化學和分析化學的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學科。

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